Aislamiento y propagación del virus de la hepatitis E en diferentes líneas celulares / Isolation and propagation of hepatitis E virus in several cell lines

Antecedentes: el virus de la hepatitis E es el agente causal de la hepatitis E. Las propiedades biológicas y moleculares de las cepas asiáticas del VHE ya han sido exploradas en cultivos celulares. Objetivos: aislar y propagar una cepa cubana del virus de la hepatitis E en diferentes líneas celulares. Métodos: la monocapa de las células A549 fue inoculada con una suspensión de heces obtenida de un paciente con diagnóstico serológico y molecular de hepatitis E. Estas células fueron observadas hasta el décimo pase. Mientras que, las líneas celulares MRC5, LLCMK2, HEP-2, FRhK4 y HeLa fueron utilizadas para propagar el virus de la hepatitis E, a partir del sobrenadante obtenido del tercer pase en A549. Estas células fueron seguidas hasta el tercer pase. El ARN y los antígenos de la cepa ECV/2349-03 fueron identificados por TR-RCP e inmunofluorescencia indirecta. Resultados: en las células A549 el ECP apareció desde el primer pase, a los 3 d de posinoculación. El genoma y los antígenos del virus fueron identificados en todos los pases seriados. En el resto de las líneas celulares estudiadas no se observó el ECP. En estas células el material genético del virus de la hepatitis E se detectó desde el primer pase y los antígenos a partir del segundo pase, excepto en las HeLa. Conclusiones: estos resultados confirman que las células A549 pueden ser utilizadas para aislar y propagar el virus de la hepatitis E, mientras que las células MRC5, LLCMK2, HEP-2 y FRhK4 son capaces de mantener el crecimiento viral.

Background: hepatitis E virus (HEV) is the causative agent of hepatitis E. Biological and molecular properties of Asian HEV strains have been explored in cells cultures. Objetives: the aim of this investigation was to isolate and propagate a Cuban HEV isolate in different cell lines. Methods: A549 cells monolayer was infected with faeces suspension from patient with sporadic hepatitis E and followed up until tenth passage. Lately, the supernatant harvested from third passage in A549 cells was inoculated in MRC5, HEP-2, LLCMK2, HeLa y FRhK4 for propagation study. These cells were observed up to third passage. RNA and viral antigen of ECV/2349-03 HEV strain were identified by RT-PCR and indirect immunofluorescence. Results: CPE appeared since first passage, at third day of post-inoculation in A549 cells. HEV antigens and genome were detected in all serial passages. CPE was not observed in the rest of cellular cultures. In the cells used for propagation the viral genome was observed from first passage, while the antigens were detected since second passage, except HeLa. Conclusions: these results confirm that A549 can be used to isolate and propagate HEV. Meanwhile, the MRC5, HEP-2, LLCMK2 and FRhK4 were able to support viral growing.

Hepatitis C en pacientes VIH positivos / Hepatitis C virus in HIV-positive patients

Introducción: la infección por el virus de la hepatitis C (VHC) es un problema de salud mundial. El VHC y el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) comparten similares vías de transmisión y algunas características epidemiológicas; en coinfectados VHC/VIH, el comportamiento de la hepatitis y la evolución de la infección por VIH es acelerado. OBJETIVOS: contribuir al conocimiento de la infección por VHC en pacientes VIH (+), determinar la prevalencia de anticuerpos al VHC (anti-VHC) en un grupo de pacientes VIH (+), relacionar la detección del ARN-VHC con las fases VIH o sida, de estos pacientes y con el sexo. Métodos: se estudiaron 1 065 muestras de sueros de pacientes VIH (+) recibidas en el Laboratorio Nacional de Referencia de Hepatitis viral, Instituto de Medicina Tropical Pedro Kourí, durante 2007. Las técnicas utilizadas fueron la determinación de anticuerpos al VHC (anti-VHC) por UMELISA HCV y determinación de ARN del VHC por UMELOSA HCV (Centro de Inmunoensayo). Resultados: 14,27 por ciento de los pacientes VIH fueron positivos a anti-VHC; a un grupo de estos con cifras de transaminasas por encima de los valores normales, se les realizó la técnica de UMELOSA y se detectó un elevado porcentaje de positividad (77,7 por ciento) al ARN a VHC, como se reporta en la literatura universal. De los pacientes que estaban replicando VHC, 80 por ciento estaba en fase SIDA; además, predominaron los pacientes del sexo masculino. Conclusiones: se confima la importancia de la infección por VHC en los pacientes VIH (+).

Background: the infection produced by the hepatitis C virus (HCV) is a world health problem. The HCV and the human immunodeficiency virus (HIV) share communicable ways and some epidemiological characteristics; in coinfected HCV/HIV patients, the behavior and the evolution of the infection in HIV patients is accelerated. Objectives: to contribute to the expansion of knowledge on HCV infection in HIV-positive patients; to determine the anti-HCV prevalence in a group of HIV-positive patients; to associate the detection of the RNA-HCV with the HIV or AIDS stages in these patients and with the sex. Methods: one thousand and sixty five serum samples from HIV-positive patients were examined in the National Reference Laboratory of Viral Hepatitis of Pedro Kourí Institute of Tropical Medicine during 2007. The used techniques were: antibodies to HCV determination using the UMELISA HCV and determination HCV RNA by UMELOSA HCV (Inmunoassay Center). Results: in HIV-positive patients, 14.27 percent was positive to anti-HVC; besides, a group of them with aminotransferase count above the normal values was applied UMELOSA, thus detecting a high percent (77.7 percent) of positivity to HCV RNA, this results is in line with those reported in international literature. Almost 80 percent of the patients that presented with HCV replication were already in the AIDS phase. The male sex was predominant. Conclusions: these results confirmed the weight of the HCV infection in HIV-positive patients.

Vigilancia de las hepatitis virales: resultados de laboratorio: Cuba, 1992-2004 / Surveillance of viral hepatitis: laboratory results: Cuba, 1992-2004

Se presentaron los resultados de la vigilancia de la hepatitis viral en el período 1992-2004. La infección por el virus de la hepatitis A es la más frecuente asociación que origina cuadros de hepatitis viral aguda entre los pacientes menores de 24 años y antígeno de superficie de la hepatitis B (AgsHB) positivo, seguida por el virus de la hepatitis B. El virus de la hepatitis A solo o con el virus de la hepatitis B, aporta 48,88 por ciento de los casos. Solamente 48,71 por ciento en que se sospecha una hepatitis B aguda, se confirman desde el punto de vista virológico. Estos resultados permiten profundizar en el conocimiento del comportamiento de los virus de las hepatitis en las condiciones cubanas, lo que hará posible formular mejores estrategias de control o eliminación de la hepatitis viral, o ambos

The results of the surveillance of the viral hepatitis in the period 1992-2004 are presented. The HAV infection is the most frequent association that originates pictures of acute viral hepatitis among the patients under 24 years old with positive HBsAg, followed by the hepatitis B virus. The hepatitis A virus alone or co-infected with the hepatitis B virus accounts for 48.88% of the cases. Only 48.71% of the cases among whom acute hepatitis B is suspected, are confirmed from the virological point of view. These results allow to go deep into the knowledge of the behaviour of hepatitis viruses under the Cuban conditions, making possible to establish better strategies for the control or elimination of viral hepatitis, or both.

Detección de marcadores de hepatitis B y hepatitis C en pacientes VIH positivos, 2000-2004 / Detection of hepaptitis B and hepatitis C markers in HIV positive patients, 2000-2004

Se estableció como objetivo conocer la coinfección entre los virus de la hepatitis B (VHB), hepatitis C (VHC) y virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) en el período estudiado. Existe una asociación marcada entre estos virus, porque la vías de transmisión y los grupos de riesgo son muy similares. Durante los años 2000-2004 se recibieron en el Laboratorio Nacional de Referencia de Hepatitis viral (IPK), 2 994 muestras de sueros de pacientes VIH (+) para investigar antígeno de superficie al VHB (HBsAg) y anticuerpos anti-VHC, ambos por la técnica de UMELISA (Centro de Inmunoensayo, CIE, La Habana, Cuba). Se realizó análisis estadístico de los resultados por el programa Epi Info (Versión 6,04). Se encontró en 10,3 por ciento positividad al HBsAg, 10,4 por ciento tenía anticuerpos anti-VHC y hubo coinfección VHB, VHC y VIH en 1,7 por ciento. Se confirmó lo planteado en la literatura sobre las coinfecciones VHB, VHC y VIH

Seroprevalencia y factores asociados a la hepatitis C en los municipios Playa y Marianao / Serological prevalence and risk factors associated to hepatitis C in the municipalities of Playa and Marianao

La Hepatitis C es uno de los principales problemas de salud a escala mundial. Objetivo: Medir la prevalencia de hepatitis C y algunos factores de riesgo asociados en la comunidad. Métodos: Se realizó en los municipios Marianao y Playa en Ciudad de La Habana una encuesta sero-epidemiológica a una muestra aleatoria de 642 habitantes para identificación de anticuerpos al virus de hepatitis C (anti-VHC) por inmunoensayo y estudio de algunos factores de riesgo. Además se realizó la prueba RT-PCR para confirmar la viremia a los casos positivos y la prueba del VIH para identificar coinfección. Resultados: Se encontraron 4 casos con anticuerpos VHC, para una prevalencia general de 0.6% y un intervalo de confianza 95% (IC 95%) entre 0.19 – 1.7 correspondiendo al municipio de Marianao una prevalencia de 0.3% (IC 95%: 0.01- 1.95) y a Playa 0.9% (IC 95%: 0.24 – 3.0) no identificando casos de coinfección con el Virus de Inmunodeficiencia Humana (VIH). La prevalencia en el grupo de 5 a 11 años de edad fue 1.6% (IC 95%: 0.08-10.1). Entre 40 a 49 años la prevalencia fue del 1.6% (IC 95%: 0.27- 6.14) al registrar 2 casos, únicos además con infección activa para un 50% del total de infectados en la comunidad. Entre adultos mayores (50-59 años) la prevalencia fue de 1% (IC 95%: 0.05-6.97). En el análisis de regresión logística multivariada los factores de riesgo más asociados en mayores de 11 años de edad fueron el cambio de pareja sexual (OR: 3.97; IC 95%: 0.35-44.71) y la transfusión sanguínea (OR: 10.57; IC 95%: 0.94 -118.55), aproximándose esta última a tener un valor significativo (p=0.055). Conclusión: La prevalencia en la comunidad de VHC fue baja estando mayormente asociada a antecedentes de transfusión sanguínea

Vigilancia de los hijos de madres positivas al antígeno de superficie de hepatitis B, 2000-2002 / Surveillance in children of mothers positive to hepatitis B surface antigen, 2000-2002

Se hizo este estudio como parte del Programa de Vigilancia que desde hace 10 años se realiza para el control perinatal de la hepatitis B en hijos de madres positivas. El control de la hepatitis B se debe fundamentalmente a la existencia de las vacunas contra esta entidad, en Cuba se cuenta con una vacuna segura y efectiva para su prevención. El riesgo de la infección perinatal, entre niños de madres positivas al antígeno de superficie de hepatitis B (AgsHB) es elevado. Muchas de estas infecciones pueden ser prevenidas si las embarazadas positivas al AgsHB son detectadas precozmente y sus hijos son vacunados al nacer. Desde septiembre de 2000 hasta diciembre de 2002, se investigaron 121 muestras de sueros de madres positivas y sus respectivos hijos a los 7 meses de edad, procedentes de todo el país, recibidas en el Laboratorio Nacional de Referencia de Hepatitis viral del Instituto de Medicina Tropical ôPedro Kouríö. A todas las muestras se les realizó la prueba para detectar AgsHB y a los niños negativos al AgsHB se les investigó anticuerpos anti-HBs. En las madres se encontró 100 por ciento de positividad al AgsHB, en los niños se obtuvo 5,7 por ciento de positividad a este antígeno. En los niños negativos la seroprotección alcanzada en este grupo fue de 94,7 por ciento con un Título Promedio Geométrico (TPG) de anti-HBs de 233,3 UI/L, predominaron los hijos normorrespondedores con 52,6 por ciento y el índice de eficacia de la vacuna utilizada osciló entre 95,9 y 99,3 por ciento